葉綠素熒光儀是用于測量植物葉片中葉綠素熒光的儀器,有助于了解植物的光合作用效率、光能利用和環(huán)境適應性等方面的問題。以下是使用該儀器的基本步驟:
1.準備工作
檢查設(shè)備:確保熒光儀、計算機(如需)、數(shù)據(jù)采集軟件、光源、樣品夾等配件齊全且功能正常。檢查電池電量或接通電源,確認探頭、數(shù)據(jù)線連接穩(wěn)固。
清潔與校準:清潔儀器外殼及探頭光學窗口,使用鏡頭紙蘸純水擦拭污漬。進行零點校準(純水背景)和標準溶液校準(已知濃度葉綠素a),確保測量準確性。
預熱儀器:開機后預熱1分鐘(部分高精度儀器需更長時間),使光源穩(wěn)定。
選取與處理樣本:選擇健康無病害的葉片,避免表面污染(如灰塵)。若測量活體藻類,需避光靜置5分鐘以消除光適應影響。
放置樣本:將葉片平整放入樣品夾或測量窗口,確保與探頭緊密接觸,避免損傷組織。
3.參數(shù)設(shè)置
基礎(chǔ)參數(shù):根據(jù)實驗需求設(shè)置光照強度、測量時間、采樣間隔等。例如,手持式儀器可通過菜單鍵調(diào)整閃光脈沖(30%強度)、超級脈沖(80%強度)等選項。
模式選擇:快速檢測模式直接讀取實時熒光值(RFU);多參數(shù)測量需依次觸發(fā)光化光(Actinic Light)和飽和脈沖(Saturating Pulse)。
4.葉綠素熒光儀開始測量
啟動測量程序:按下測量按鈕或通過觸摸屏啟動,保持儀器穩(wěn)定并與樣本距離適當,防止數(shù)據(jù)波動15。
監(jiān)測與記錄:等待數(shù)據(jù)穩(wěn)定(通常5-10秒),記錄熒光值或自動存儲至存儲器/電腦。注意觀察屏幕波形是否穩(wěn)定,排除異常干擾。
5.數(shù)據(jù)處理
導出與分析:將數(shù)據(jù)導出至計算機,使用專業(yè)軟件進行擬合、濾波等處理。通過標定曲線將相對熒光單位(RFU)轉(zhuǎn)換為葉綠素a濃度。
結(jié)果解讀:分析SPAD值、Fv/Fm等參數(shù),評估植物健康狀況或光合能力。
6.維護收尾
清潔保養(yǎng):用純水沖洗探頭并軟布擦干,避免殘留物腐蝕。清潔儀器表面時禁用化學清潔劑。
規(guī)范存放:斷開電源,將儀器存放于干燥通風處,避免陽光直射或極*溫濕度。
